細胞凍存有何注意事項？

細胞低溫凍存是培養室常用技術(shù)。原理是將細胞放在-196℃液氮中，可以使細胞暫時(shí)脫離生長(cháng)狀態(tài)，減少細胞代謝，理論上儲存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。那么細胞凍存有何注意事項呢？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、DMS0稀釋時(shí)會(huì )釋放大量熱量，不能直接加到細胞液中，須事先配制，且DMSO必須是細胞培養級別的；

二、緩慢冷凍，細胞逐步脫水，不會(huì )因產(chǎn)生大的冰晶而受到損害；

三、選擇細胞生長(cháng)良好、密度約為80-90%、活力達90%以上的細胞凍存；

四、凍存時(shí)細胞密度少于5X105個(gè)活細胞/mL時(shí)，很難成功復蘇；

五、細胞不可長(cháng)期保存在-80°C冰箱中。我們建議在-80°C冰箱中的保存時(shí)間不要超過(guò)48h，放入液氮中保存；

六、凍存細胞操作時(shí)應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷；

七、凍存管的蓋子一定要擰緊，否則復蘇水浴時(shí)會(huì )滲水，造成支原體污染；

八、定期檢查液氮儲備，保證細胞全部浸在液面下；

九、凍存細胞時(shí)在每支凍存管都標上細胞的名稱(chēng)，凍存時(shí)間，并記錄在冊，避免取錯細胞，找不到凍存管等情況；

十、細胞在冷凍過(guò)程中在-20C冰箱內放置時(shí)間不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大而破壞細胞。

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